A vector carrying the GFP gene (Green fluorescent protein) as a yeast marker for fermentation processes

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dc.contributor.authorGomes, Luiz Humberto
dc.contributor.authorDuarte, Keila Maria Roncato
dc.contributor.authorAndrino, Felipe Gabriel
dc.contributor.authorGiacomelli, Ana Maria Brancalion
dc.contributor.authorTavares, Flavio Cesar Almeida
dc.date.accessioned2024-09-16T13:14:17Z
dc.date.available2024-09-16T13:14:17Z
dc.date.issued2000
dc.description.abstractContaminant yeasts spoil pure culture fermentations and cause great losses in quality and product yields. They can be detected by a variety of methods although none being so efficient for early detection of contaminant yeast cells that appear at low frequency. Pure cultures bearing genetic markers can ease the direct identification of cells and colonies among contaminants. Fast and easy detection are desired and morphological markers would even help the direct visualization of marked pure cultures among contaminants. The GFP gene for green fluorescent protein of Aquorea victoria, proved to be a very efficient marker to visualize transformed cells in mixed populations and tissues. To test this marker in the study of contaminated yeast fermentations, the GFP gene was used to construct a vector under the control of the ADH2 promoter (pYGFP3). Since ADH2 is repressed by glucose the expression of the protein would not interfere in the course of fermentation. The transformed yeasts with the vector pYGFP3 showed high stability and high bioluminescence to permit identification of marked cells among a mixed population of cells. The vector opens the possibility to conduct further studies aiming to develop an efficient method for early detection of spoilage yeasts in industrial fermentative processes. Leveduras contaminantes podem causar grandes perdas em processos fermentativos quando infectam culturas puras e degradam a qualidade do produto final. Estas leveduras podem ser detectadas por diversos métodos mas nenhum deles oferece resultados com a exatidão e precisão necessárias, quando os contaminantes estão em baixa freqüência. Culturas puras contendo um gene marcador podem ser utilizadas para a direta identificação de células e colônias contaminantes. Detecção rápida e fácil é desejada e marcadores morfológicos podem auxiliar na visualização da cultura marcada. O gene da GFP (green fluorescent protein) extraído da Aequorea victoria mostrou-se eficiente para marcação de células, oferecendo ainda uma fácil visualização das populações e tecidos marcados. Para testar este marcador no estudo de leveduras contaminantes, o gene GFP foi usado para construir um vetor, sob o controle do promotor de ADH2, que é reprimido por glicose, não interferindo assim em nenhuma etapa do processo. A inserção do vetor com a GFP (pYGFP3) em leveduras foi um sucesso, demonstrando alta estabilidade e oferecendo com certeza, um novo método com alta eficiência para o controle de contaminantes em processos fermentativos além de servir como marcador destinado a proteção industrial do material genético.
dc.identifier.issn0103-9016
dc.identifier.otherS0103-90162000000400018-scl
dc.identifier.urihttps://repositorio-aptaregional.agricultura.sp.gov.br/handle/123456789/2604
dc.language.isoen
dc.relation.ispartofScientia Agricola
dc.subjectSaccharomyces cerevisiae
dc.subjectGFP (green fluorescent protein)
dc.subjectprocessos fermentativos
dc.subjectSaccharomyces cerevisiae
dc.subjectGFP (green fluorescent protein)
dc.subjectfermentative processes
dc.subject.keywordsProcessos
dc.subject.keywordsFermentação
dc.titleA vector carrying the GFP gene (Green fluorescent protein) as a yeast marker for fermentation processes
oaire.citation.endPage716
oaire.citation.issue4
oaire.citation.startPage713
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